真核生物中mRNA经转录后修饰可在5'端形成一个特殊结构，即帽子结构，该结构对mRNA的稳定、转运与翻译过程均有较重要作用。牛痘病毒加帽酶是催化形成帽子结构的有效酶，其由D1和D12两个亚基组成，兼具RNA三磷酸酯酶活性（TPase）、鸟苷酰基转移酶活性（GTase）和鸟嘌呤甲基转移酶活性（N7 MTase）。牛痘病毒加帽酶参与作用下的mRNA加帽过程，在mRNA 5'端添加一个7-甲基鸟嘌呤帽结构（m7Gppp），即为Cap0。

mRNA +1位核苷酸的核糖2’位羟基也可以甲基化，产物称为Cap1，人类的mRNA都具有Cap1结构。Cap1不仅与翻译起始有关，在针对外源RNA的先天免疫系统中，还可作为自身RNA的标志。2-O-甲基转移酶可以在mRNA +1位核苷酸的2´-OH位置处添加一个甲基基团，最终形成最有Cap1结构的mRNA。

该产品主要应用于RNA体外转录之后加帽，形成具有Cap1帽子结构的mRNA。

加帽率高：加帽率可高达99%

产品稳定性强：批次差异CV<5%

适用性强：加帽的mRNA可应用于多种场景。

操作简单：两步法加帽需要的牛痘病毒加帽酶等物料均包含在试剂盒里。

1、加帽率数据：分别对2K 和4K的片段参照说明书进行操作，使用LC-MS对2K的序列进行加帽率检测，加帽率都在99%以上。

图1：2K加帽率解卷积分子量图谱

图2：4K加帽率解卷积分子量图谱

2、批次稳定性数据

对4K 片段分别进行批次间的稳定性验证，批次间的CV<5%, 加帽率也均在99%以上。

3、完整度高

采用CE的方法分别对2K、4K的片段进行完整度检测，2K和4K的完整度>92%，9K的完整度>87%。

-25~-15℃保存，有效期1年。